一種乳酸乳酸鏈球菌素高表達(dá)菌株的構(gòu)建方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202011420240.9 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN113025543A 公開(kāi)(公告)日 2021-06-25
申請(qǐng)公布號(hào) CN113025543A 申請(qǐng)公布日 2021-06-25
分類(lèi)號(hào) C12N1/21;C12N15/31;C12N15/54;C12N15/74;C12R1/46 分類(lèi) 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 洛克珊娜;奧蘭多;徐洪利;高祥友 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 山東元泰生物工程有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 276800 山東省日照市經(jīng)濟(jì)開(kāi)發(fā)區(qū)淮安路398號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種乳酸乳酸鏈球菌素高表達(dá)菌株的構(gòu)建方法,涉及工業(yè)領(lǐng)域,將野生型乳酸乳球菌菌株中的nisA和nisRK基因克隆到高拷貝數(shù)載體中,將得到的質(zhì)粒pMG36e:nisA和pMG36e:nisRK通過(guò)單重和三重轉(zhuǎn)化導(dǎo)入乳酸乳球。本發(fā)明通過(guò)在乳酸乳球菌中引入含有nisRK的多拷貝質(zhì)粒來(lái)提高Nisin的產(chǎn)量。我們?cè)O(shè)計(jì)了攜帶nisA和nisRK基因的表達(dá)質(zhì)粒,并將工程質(zhì)粒轉(zhuǎn)入野生型菌株。Nisin作為一種信號(hào)分子,可通過(guò)雙組分信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)誘導(dǎo)Nisin生物合成基因簇的轉(zhuǎn)錄,該信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)由一個(gè)響應(yīng)調(diào)節(jié)因子和一個(gè)指定nisRK基因的組氨酸激酶組成;在野生型菌株內(nèi)轉(zhuǎn)化nisA和nisRK多拷貝基因后,其N(xiāo)isin產(chǎn)量顯著提高。