一種基于高通量測序的mRNA檢測方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201911106264.4 申請日 -
公開（公告）號 CN111118126A 公開（公告）日 2020-05-08
申請公布號 CN111118126A 申請公布日 2020-05-08
分類號 C12Q1/6869 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 畢書琳;吳淵;石銀;陳學(xué)俊;楊爽;王劍青;周文剛;鄭方克;鄭立謀 申請（專利權(quán)）人 上海廈維生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廈門市首創(chuàng)君合專利事務(wù)所有限公司 代理人 上海廈維生物技術(shù)有限公司;上海廈維醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司
地址 200000 上海市閔行區(qū)新駿環(huán)路138號3幢201,202室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種基于高通量測序的mRNA檢測方法，包括如下步驟：1)提取樣本總RNA并質(zhì)控；2)根據(jù)總RNA質(zhì)控情況進(jìn)行總RNA打斷和/或引物雜交；3)合成cDNA第一鏈；4)合成cDNA第二鏈；5)構(gòu)建鏈特異性cDNA文庫；6)第一次雜交和捕獲；7)第二次雜交和捕獲；8)捕獲后文庫擴(kuò)增及純化；9)高通量測序。本發(fā)明采用雜交捕獲的方式，特異性富集鏈特異性cDNA序列，進(jìn)行mRNA表達(dá)檢測。本發(fā)明在極低起始量和低質(zhì)量情況下仍能保證良好的檢測性能。