一種基于高通量測序的線粒體基因組文庫及其構(gòu)建方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201610308792.8 申請日 -
公開（公告）號 CN105907748B 公開（公告）日 2017-10-13
申請公布號 CN105907748B 申請公布日 2017-10-13
分類號 C12N15/10(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I;C40B40/06(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張巍 申請（專利權）人 廣州嘉檢醫(yī)學檢測有限公司
代理機構(gòu) 北京市盈科律師事務所 代理人 廣州嘉檢醫(yī)學檢測有限公司
地址 510000 廣東省廣州市廣州國際生物島螺旋四路九號二期4C棟201單元
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種基于高通量測序的線粒體基因組文庫及其構(gòu)建方法。所述構(gòu)建方法包括以下步驟：S1、自總DNA中一步PCR擴增線粒體全長DNA；S2、將線粒體全長DNA打碎，得到DNA片段；S3、對DNA片段進行末端修復，得到平末端DNA片段；S4、在平末端DNA片段3’端加A，得到加A的DNA片段；S5、在加A的DNA片段的3’端加接頭，得到加接頭的DNA片段；S6、對加接頭的DNA片段進行前LM?PCR；S7、對LM?PCR產(chǎn)物進行后PCR。本發(fā)明線粒體基因組文庫構(gòu)建方法通過自總DNA中一步PCR擴增得到線粒體全長DNA，可以保障人類線粒體基因組的精確擴增，不被在人類基因組的同源序列污染混合使突變檢測更靈敏和準確。