一種基于高通量測(cè)序的線粒體基因組文庫(kù)及其構(gòu)建方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201610308792.8 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN105907748B 公開(kāi)（公告）日 2017-10-13
申請(qǐng)公布號(hào) CN105907748B 申請(qǐng)公布日 2017-10-13
分類號(hào) C12N15/10(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I;C40B40/06(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張巍 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 廣州嘉檢醫(yī)學(xué)檢測(cè)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京市盈科律師事務(wù)所 代理人 廣州嘉檢醫(yī)學(xué)檢測(cè)有限公司
地址 510000 廣東省廣州市廣州國(guó)際生物島螺旋四路九號(hào)二期4C棟201單元
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種基于高通量測(cè)序的線粒體基因組文庫(kù)及其構(gòu)建方法。所述構(gòu)建方法包括以下步驟：S1、自總DNA中一步PCR擴(kuò)增線粒體全長(zhǎng)DNA；S2、將線粒體全長(zhǎng)DNA打碎，得到DNA片段；S3、對(duì)DNA片段進(jìn)行末端修復(fù)，得到平末端DNA片段；S4、在平末端DNA片段3’端加A，得到加A的DNA片段；S5、在加A的DNA片段的3’端加接頭，得到加接頭的DNA片段；S6、對(duì)加接頭的DNA片段進(jìn)行前LM?PCR；S7、對(duì)LM?PCR產(chǎn)物進(jìn)行后PCR。本發(fā)明線粒體基因組文庫(kù)構(gòu)建方法通過(guò)自總DNA中一步PCR擴(kuò)增得到線粒體全長(zhǎng)DNA，可以保障人類線粒體基因組的精確擴(kuò)增，不被在人類基因組的同源序列污染混合使突變檢測(cè)更靈敏和準(zhǔn)確。