一種半乳糖神經(jīng)酰胺轉(zhuǎn)移酶抑制劑藥物的快速篩選方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811635607.1 申請日 -
公開（公告）號 CN109709202A 公開（公告）日 2019-05-03
申請公布號 CN109709202A 申請公布日 2019-05-03
分類號 G01N27/62（2006.01）I 分類 測量；測試;
發(fā)明人 白艷秋; 吳治昊; 王朝弘; 劉豫屏 申請（專利權(quán)）人 輝源生物科技（上海）有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海科盛知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 趙志遠(yuǎn)
地址 201203 上海市浦東新區(qū)張江高科技園區(qū)哈雷路1011號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種半乳糖神經(jīng)酰胺轉(zhuǎn)移酶抑制劑藥物的快速篩選方法，包括以下步驟：(1)人工合成人類的半乳糖神經(jīng)酰胺轉(zhuǎn)移酶的核醣核酸，然后將半乳糖神經(jīng)酰胺轉(zhuǎn)移酶的核醣核酸轉(zhuǎn)建構(gòu)在哺乳細(xì)胞表達(dá)載體pDNA3.1(+)上，得到人類半乳糖神經(jīng)酰胺轉(zhuǎn)移酶過表達(dá)載體；(2)將人類半乳糖神經(jīng)酰胺轉(zhuǎn)移酶過表達(dá)載體在非人源細(xì)胞上進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染，然后進(jìn)行裂解細(xì)胞并提取細(xì)胞裂解蛋白；(3)將提取獲得的細(xì)胞裂解蛋白以及反應(yīng)底物置于反應(yīng)緩沖液中，加入待篩選的半乳糖神經(jīng)酰胺轉(zhuǎn)移酶抑制劑藥物，進(jìn)行反應(yīng)后，檢測底物及反應(yīng)產(chǎn)物的含量，然后確定待篩選的半乳糖神經(jīng)酰胺轉(zhuǎn)移酶抑制劑藥物的抑制效果。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明建立了快速且穩(wěn)定的篩選方式。