一種快速篩選原核蛋白表達(dá)菌的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202111259682.4 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN113917140A 公開(kāi)（公告）日 2022-01-11
申請(qǐng)公布號(hào) CN113917140A 申請(qǐng)公布日 2022-01-11
分類(lèi)號(hào) G01N33/569;G01N33/577 分類(lèi) 測(cè)量；測(cè)試;
發(fā)明人 付康 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 生工生物工程（上海）股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京超凡宏宇專(zhuān)利代理事務(wù)所（特殊普通合伙） 代理人 覃蛟
地址 201600 上海市松江區(qū)香閔路698號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種快速篩選原核蛋白表達(dá)菌的方法，涉及蛋白原核表達(dá)系統(tǒng)領(lǐng)域。本發(fā)明將熱激后的感受態(tài)細(xì)胞直接與誘導(dǎo)劑混合，而后將二者的混合液涂布于含有抗生素的平板上，可以同時(shí)節(jié)省活化的時(shí)間和檢測(cè)的時(shí)間，縮減了活化后再誘導(dǎo)的冗長(zhǎng)步驟、SDS?PAGE檢測(cè)和Westernblot等驗(yàn)證過(guò)程。通過(guò)改進(jìn)誘導(dǎo)方法和篩選方法，采用Dotblot(斑點(diǎn)印記)可以快速實(shí)現(xiàn)多個(gè)單克隆菌落的鑒定，從而有助于更快速的獲得原核蛋白表達(dá)的陽(yáng)性菌。整個(gè)過(guò)程僅僅需要2?3天，可以極大程度上縮減工作量以及實(shí)驗(yàn)周期，有利于節(jié)約科研人員的寶貴時(shí)間。