重組腸道病毒71型病毒VP1抗原的純化方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201010202876.6 申請日 -
公開（公告）號 CN101857871A 公開（公告）日 2010-10-13
申請公布號 CN101857871A 申請公布日 2010-10-13
分類號 C12N15/41(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C07K14/085(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 吳強(qiáng);周林福 申請（專利權(quán)）人 杭州浙大紫金生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 杭州中成專利事務(wù)所有限公司 代理人 杭州浙大紫金生物科技有限公司
地址 310013 浙江省杭州市濱江區(qū)南環(huán)路4028號1號樓307室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及基因工程重組蛋白的純化方法，旨在提供一種重組腸道病毒71型病毒VP1抗原的純化方法。該方法包括：利用大腸桿菌表達(dá)生產(chǎn)重組腸道病毒71型病毒VP1蛋白，得到該蛋白的包涵體；將包涵體溶解于增溶液中；在水浴和磁力攪拌條件下向復(fù)性液中逐滴加入包涵體溶液，然后在攪拌復(fù)性48小時(shí)。本發(fā)明提出通過蛋白復(fù)性能使以包涵體形式存在的蛋白變成可溶性蛋白，大大提高了表達(dá)產(chǎn)物的回收率。采用親和層析一步純化，純度大于95％。純化的方法操作簡單、方便、省時(shí)，有利于大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)。具有成本低廉、工藝簡便，純化蛋白純度高等優(yōu)點(diǎn)，可以為EV71型診斷試劑的開發(fā)和血清流行病學(xué)調(diào)查提供診斷用抗原。