一種提高嗜熱鏈球菌高密度的培養(yǎng)方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110226173.5 申請日 -
公開（公告）號 CN113215070A 公開（公告）日 2021-08-06
申請公布號 CN113215070A 申請公布日 2021-08-06
分類號 C12N1/21（2006.01）I;C12N15/74（2006.01）I;C12R1/46（2006.01）N 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 方曙光;汪欣;郭曉娟;朱建國 申請（專利權(quán)）人 漯河微康生物科技有限公司
代理機構(gòu) 北京聯(lián)瑞聯(lián)豐知識產(chǎn)權(quán)代理事務所（普通合伙） 代理人 郭堃
地址 462300河南省漯河市郾城區(qū)淞江路西段方匯花園北鄰
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種提高嗜熱鏈球菌高密度的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：（S1）重組質(zhì)粒的構(gòu)建：在NCBI數(shù)據(jù)庫中得到來源于Streptococcus equ inus淀粉酶基因，并且連接在組成型載體pMG36e中，酶切位點為Nde I和BspH I；（S2）氯化鈣法嗜熱鏈球菌的感受態(tài)細胞制備；（S3）重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化；（S4）陽性克隆子的培養(yǎng)：在MRS固體培養(yǎng)基中長出的單菌落挑取培養(yǎng)在含有紅霉素的MRS液體培養(yǎng)基中，37℃，200rpm環(huán)境中震蕩培養(yǎng)9?16h，作為后續(xù)的種子液；（S5）高溫滅菌和（S6）接種。利用基因工程技術(shù)嗜熱鏈球菌體內(nèi)導入淀粉酶基因，可以達到嗜熱鏈球菌在厭氧培養(yǎng)下的高密度培養(yǎng)方法，以達到高密度菌種在食品領域的應用。