纖溶酶抑制劑rPI-T1的分離純化方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201810282901.2 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN110343170B 公開（公告）日 2021-09-28
申請(qǐng)公布號(hào) CN110343170B 申請(qǐng)公布日 2021-09-28
分類號(hào) C07K14/81（2006.01）I;C12P21/02（2006.01）I;C07K1/18（2006.01）I;C07K1/14（2006.01）I;C12R1/84（2006.01）N 分類 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 徐梅;楊宇;陳宏超;康樂;李娜;石喬;蘭海英;石皎;李萍;王宏英;薛百忠 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 遠(yuǎn)大生命科學(xué)（遼寧）有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京泛華偉業(yè)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 李渤;郭廣迅
地址 110171遼寧省沈陽(yáng)市渾南新區(qū)南屏東路18-1號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種纖溶酶抑制劑rPI?T1的分離純化方法，其包括發(fā)酵分泌表達(dá)rPI?T1的畢赤酵母，將包含rPI?T1的發(fā)酵液的上清液經(jīng)Capto?MMC層析柱洗脫，收集得到包含rPI?T1的洗脫液I；將獲得的洗脫液I經(jīng)Qhp層析柱洗脫，收集得到包含rPI?T1的洗脫液II。該方法是一種畢赤酵母分泌表達(dá)蛋白rPI?T1的簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定、高效的分離純化方法。涉及以畢赤酵母菌無機(jī)鹽培養(yǎng)基發(fā)酵高效表達(dá)目標(biāo)蛋白rPI?T1，并將發(fā)酵液上清經(jīng)離心、微濾、層析等步驟進(jìn)行純化的方法。本方法純化收率高，熱原檢測(cè)批間穩(wěn)定合格，活性蛋白收率達(dá)到90％以上，C18HPLC分析純度達(dá)到97％以上；具有對(duì)以重組畢赤酵母菌分泌表達(dá)蛋白的通用性，整體步驟少、效率高、收率高、工藝過程時(shí)間短、蛋白純度高及易于產(chǎn)業(yè)化放大等顯著特點(diǎn)。