利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)對橡膠草或蒲公英基因定點突變的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011140708.9 申請日 -
公開（公告）號 CN112280799A 公開（公告）日 2021-01-29
申請公布號 CN112280799A 申請公布日 2021-01-29
分類號 C12N15/82;C12N15/29;A01H5/00;A01H6/14 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 覃碧;劉實忠;王鋒;張立群;楊玉雙;聶秋海;張繼川;王肖肖 申請（專利權(quán)）人 北京玲瓏蒲公英科技發(fā)展有限公司
代理機構(gòu) 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 商秀玲
地址 571101 海南省?？谑旋埲A區(qū)學(xué)院路4號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及植物基因編輯技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)對橡膠草或蒲公英基因定點突變的方法。本發(fā)明的基因定點突變的方法中，針對目標基因設(shè)計基于CRISPR/Cas9的打靶sgRNA序列，使用一個CmYLCV啟動子可驅(qū)動多個sgRNA，采用20bp的Csy4發(fā)夾序列對不同的打靶sgRNA進行間隔構(gòu)建CRISPR/Cas9載體并轉(zhuǎn)入攜帶靶基因的受體材料中，獲得靶基因定點突變的突變植株。本發(fā)明的方法極大地提高多靶標同時敲除載體構(gòu)建的效率和基因突變率，具有實驗周期短、操作簡便等特點，為橡膠草、蒲公英的基因突變奠定技術(shù)基礎(chǔ)，為橡膠草、蒲公英改良育種提供了新方法。