一種利用紅色熒光蛋白用做水稻轉(zhuǎn)化篩選標(biāo)記的轉(zhuǎn)化方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201010563552.5 申請日 -
公開（公告）號 CN102199619A 公開（公告）日 2011-09-28
申請公布號 CN102199619A 申請公布日 2011-09-28
分類號 C12N15/82(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 鄧興旺;王海洋;萬向元;周君莉 申請（專利權(quán)）人 北京凱拓迪恩生物技術(shù)研發(fā)中心有限責(zé)任公司
代理機構(gòu) - 代理人 -
地址 100085 北京市海淀區(qū)上地西路39號北大生物城
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種利用紅色熒光蛋白做篩選標(biāo)記的轉(zhuǎn)化方法。我們合成了FP基因并根據(jù)水稻密碼子偏好性進行了修改，用它作為水稻轉(zhuǎn)化和植株再生的篩選標(biāo)記基因。FP基因由愈傷組織/種皮特異啟動子驅(qū)動，并與目的基因緊密連接，由農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)入水稻胚性愈傷。在共培養(yǎng)后的30天內(nèi)利用熒光顯微鏡進行三次篩選。獲得的轉(zhuǎn)基因苗利用PCR以及Southern雜交進一步驗證，結(jié)果表明，轉(zhuǎn)基因苗陽性率高達80%，證明了FP作為植物轉(zhuǎn)化的篩選標(biāo)記是完全可行的。本發(fā)明有效降低了傳統(tǒng)篩選標(biāo)記如抗生素和除草劑抗性基因?qū)Νh(huán)境和食品安全的潛在危害，是一種新型的安全的植物遺傳轉(zhuǎn)化篩選系統(tǒng)。