一種利用紅色熒光蛋白用做水稻轉(zhuǎn)化篩選標(biāo)記的轉(zhuǎn)化方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201010563552.5 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN102199619B 公開(kāi)（公告）日 2013-05-15
申請(qǐng)公布號(hào) CN102199619B 申請(qǐng)公布日 2013-05-15
分類(lèi)號(hào) C12N15/82(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 鄧興旺;王海洋;萬(wàn)向元;周君莉 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 北京凱拓迪恩生物技術(shù)研發(fā)中心有限責(zé)任公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 100085 北京市海淀區(qū)上地西路39號(hào)北大生物城
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種利用紅色熒光蛋白做篩選標(biāo)記的轉(zhuǎn)化方法。我們合成了FP基因并根據(jù)水稻密碼子偏好性進(jìn)行了修改，用它作為水稻轉(zhuǎn)化和植株再生的篩選標(biāo)記基因。FP基因由愈傷組織/種皮特異啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)，并與目的基因緊密連接，由農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)入水稻胚性愈傷。在共培養(yǎng)后的30天內(nèi)利用熒光顯微鏡進(jìn)行三次篩選。獲得的轉(zhuǎn)基因苗利用PCR以及Southern雜交進(jìn)一步驗(yàn)證，結(jié)果表明，轉(zhuǎn)基因苗陽(yáng)性率高達(dá)80%，證明了FP作為植物轉(zhuǎn)化的篩選標(biāo)記是完全可行的。本發(fā)明有效降低了傳統(tǒng)篩選標(biāo)記如抗生素和除草劑抗性基因?qū)Νh(huán)境和食品安全的潛在危害，是一種新型的安全的植物遺傳轉(zhuǎn)化篩選系統(tǒng)。