一種白細(xì)胞介素-2基因工程人胃癌細(xì)胞的制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN200810036027.0 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN101560498A 公開（公告）日 2009-10-21
申請(qǐng)公布號(hào) CN101560498A 申請(qǐng)公布日 2009-10-21
分類號(hào) C12N5/10(2006.01)I;C12N15/26(2006.01)I;C12N15/867(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳詩(shī)書;錢關(guān)祥 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 上海四勝企業(yè)管理咨詢有限公司
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地址 200025上海市重慶南路227號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種白細(xì)胞介素-2基因工程人胃癌細(xì)胞的制備方法。從經(jīng)PHA誘導(dǎo)的人外周血單核細(xì)胞中抽提mRNA，在體外合成cDNA，運(yùn)用聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)克隆了含有信號(hào)肽的白細(xì)胞介素-2 cDNA，并與缺陷型逆轉(zhuǎn)錄病毒載體LXSN進(jìn)行重組，構(gòu)建了含白細(xì)胞介素-2 cDNA的重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體L(IL-2)SN。采用安全性較高的第二代包裝細(xì)胞PA317對(duì)含IL-2基因的缺陷型逆轉(zhuǎn)錄病毒載體L(IL-2)SN進(jìn)行包裝，產(chǎn)生出具有高滴度且不具有復(fù)制能力的重組逆轉(zhuǎn)錄病毒，感染人胃癌細(xì)胞株MKN-45，建立了具有白細(xì)胞介素-2表達(dá)活性的基因工程人胃癌細(xì)胞。