一種滅活的白細胞介素-2基因工程人胃癌細胞瘤苗的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN200810036026.6 申請日 -
公開（公告）號 CN101560497A 公開（公告）日 2009-10-21
申請公布號 CN101560497A 申請公布日 2009-10-21
分類號 C12N5/10(2006.01)I;C12N15/26(2006.01)I;C12N15/867(2006.01)I;C12N13/00(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳詩書;錢關祥 申請（專利權）人 上海四勝企業(yè)管理咨詢有限公司
代理機構 - 代理人 -
地址 200025上海市重慶南路227號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種滅活的白細胞介素-2基因工程人胃癌細胞瘤苗的制備方法。從經(jīng)PHA誘導的人外周血單核細胞中抽提mRNA，在體外合成cDNA，運用聚合酶鏈反應技術克隆了含有信號肽的白細胞介素-2 cDNA，并與缺陷型逆轉(zhuǎn)錄病毒載體LXSN進行重組，構建了含白細胞介素-2 cDNA的重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體L(IL-2)SN。采用安全性較高的第二代包裝細胞PA317對含IL-2基因的缺陷型逆轉(zhuǎn)錄病毒載體L(IL-2)SN進行包裝，產(chǎn)生出具有高滴度且不具有復制能力的重組逆轉(zhuǎn)錄病毒，感染人胃癌細胞株MKN-45，建立了具有白細胞介素-2表達活性的基因工程人胃癌細胞，應用60Co照射，在摸索了不同的照射劑量后，制備了滅活白細胞介素-2基因工程人胃癌細胞瘤苗。