一種嗜熱脂肪土芽孢脂肪酶基因分泌表達方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201810742584.8 申請日 -
公開（公告）號 CN108795959A 公開（公告）日 2018-11-13
申請公布號 CN108795959A 申請公布日 2018-11-13
分類號 C12N15/55;C12N15/81;C12N9/20 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王瑞工;劉伊佳;李逸明 申請（專利權(quán)）人 深圳昇瑞生物科技有限公司
代理機構(gòu) 深圳眾贏通寶知識產(chǎn)權(quán)代理事務所（普通合伙） 代理人 潘瓊
地址 518000 廣東省深圳市福田區(qū)園嶺街道八卦四路10號中浩大廈2407室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種嗜熱脂肪土芽孢脂肪酶基因分泌表達方法，Genbank中搜索獲得嗜熱脂肪土芽孢脂肪酶成熟肽基因，按照畢赤酵母對遺傳密碼子的喜好性對嗜熱脂肪土芽孢脂肪酶成熟肽基因進行密碼子優(yōu)化；按照定點突變PCR的要求，分別設計三對引物；對三輪Kex2定點突變后的嗜熱脂肪土芽孢脂肪酶成熟肽基因進行測序；將合成的野生型或Kex2定點突變的嗜熱脂肪土芽孢脂肪酶成熟肽基因與畢赤酵母表達質(zhì)粒分別進行酶切；提取上述菌株中經(jīng)測序鑒定的質(zhì)粒，本發(fā)明通過定點突變，改變了嗜熱脂肪土芽孢脂肪酶成熟肽序列中三個潛在的絲氨酸蛋白酶識別位點Kex2，在畢赤酵母表達系統(tǒng)中獲得了全長完整表達的、有更高酶活性的嗜熱脂肪土芽孢脂肪酶。