檢測(cè)殺蟲晶體蛋白Bt Cry1Ab/Ac的方法及其專用酶聯(lián)免疫試劑盒

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201210012498.4 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN102590527B 公開(kāi)(公告)日 2014-04-23
申請(qǐng)公布號(hào) CN102590527B 申請(qǐng)公布日 2014-04-23
分類號(hào) G01N33/68(2006.01)I 分類 測(cè)量;測(cè)試;
發(fā)明人 王保民;南鐵貴;何麗珊;譚桂玉;孫碩;曹振;張亮;李召虎 申請(qǐng)(專利權(quán))人 福建超大集團(tuán)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);福建安欣睿捷生物科技有限公司
地址 100193 北京市海淀區(qū)圓明園西路2號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種檢測(cè)殺蟲晶體蛋白Bt?Cry1Ab/Ac的方法及其專用酶聯(lián)免疫試劑盒。該方法及試劑盒所使用的抗Bt?Cry1Ab/Ac的單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞株Bt2F9分泌產(chǎn)生的,該雜交瘤細(xì)胞株在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心的登記入冊(cè)編號(hào)為CGMCC?No.5162。本發(fā)明所提供單克隆抗體是同時(shí)以Bt?Cry1Ac蛋白溶液和轉(zhuǎn)Bt?Cry1Ac基因棉花植株葉片的提取液為包被抗原,通過(guò)間接非競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行篩選得到的、對(duì)在植物中表達(dá)的Bt?Cry1Ab/Ac蛋白具有高親和力的抗體,親和常數(shù)為1.03×109M-1;利用該單克隆抗體制備得到的雙抗夾心酶聯(lián)免疫試劑盒,用于定性或定量檢測(cè)棉花、玉米等轉(zhuǎn)基因植物中的Bt?Cry1Ab/Ac蛋白,線性檢測(cè)范圍在0.78~50ng/mL,具有快速、靈敏的優(yōu)點(diǎn)。