轉(zhuǎn)基因豬的培育方法和應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201810150399.X 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN108486152A 公開（公告）日 2018-09-04
申請(qǐng)公布號(hào) CN108486152A 申請(qǐng)公布日 2018-09-04
分類號(hào) C12N15/85;C12N5/10;A01K67/027;A61L27/36;A61L27/38 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 胡勇;于寅 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 鑄造生物科技（深圳）有限公司
代理機(jī)構(gòu) 深圳中一聯(lián)合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 鑄造生物科技（深圳）有限公司
地址 518000 廣東省深圳市南山區(qū)西麗街道留仙村路87號(hào)海穗大廈402室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開一種轉(zhuǎn)基因豬的培育方法。所述轉(zhuǎn)基因豬的培育方法至少包括將豬原代體細(xì)胞導(dǎo)入信使RNA編碼的細(xì)胞重編程開關(guān)基因和/或miR302/367簇，使其誘導(dǎo)為RNA誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞；在Cas9?gRNA和CRE同源重組酶的作用下，敲除豬有毒基因的同時(shí)敲入若干個(gè)人基因片段，采用人源vWF基因原位替換豬內(nèi)源vWF基因，獲得PERV病毒滅活、且無人免疫排斥和凝血不兼容的基因；篩選出沒有脫靶效應(yīng)的干凈中靶細(xì)胞系并將其培養(yǎng)成豬體細(xì)胞；采用體細(xì)胞核轉(zhuǎn)移技術(shù)處理豬體細(xì)胞獲得轉(zhuǎn)基因豬。本發(fā)明獲得的轉(zhuǎn)基因豬具有PERV病毒永久性無法表達(dá)、對(duì)人體無免疫排斥和凝血兼容等優(yōu)點(diǎn)，可用作人異源器官、組織、細(xì)胞的供體。