一種重疊延伸PCR結(jié)合Sanger測序檢測不連續(xù)多DNA位點(diǎn)的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811642890.0 申請日 -
公開（公告）號 CN110157781A 公開（公告）日 2019-08-23
申請公布號 CN110157781A 申請公布日 2019-08-23
分類號 C12Q1/686;C12Q1/6869;C12N15/11 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 鄭焱;陳佩璇;盧炫廷;邱美蘭;謝龍旭;邱雪蓮;吳丹葉;徐愛娟 申請（專利權(quán)）人 廣州凱普醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司 代理人 廣州凱普醫(yī)藥科技有限公司;廣州凱普醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司;廣州凱普生物科技有限公司
地址 510000 廣東省廣州市黃埔區(qū)九龍鎮(zhèn)中新知識城鳳凰三橫路71號2號試劑車間四樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種重疊延伸PCR結(jié)合Sanger測序檢測不連續(xù)多DNA位點(diǎn)的方法，本方法一對用于重疊延伸PCR的全長擴(kuò)增的引物，其核苷酸序列如SEQ ID No.1～2所示。本發(fā)明通過一次PCR將不連續(xù)的位點(diǎn)連接成一條DNA片段，對這條包含多個檢測位點(diǎn)所在片段，可以一次性進(jìn)行Sanger測序分析，利用本發(fā)明可以將任意的2～4個包含各自檢測位點(diǎn)的片段拼接連接形成融合片段，快速、簡單，不需要限制性內(nèi)切酶，中間無任何非目的基因的DNA序列，進(jìn)而檢測的檢測突破了Sanger測序讀長的限制，可以通過一個Sanger測序反應(yīng)同時檢測多個不連續(xù)的DNA位點(diǎn)。