一種重疊延伸PCR結(jié)合Sanger測(cè)序檢測(cè)不連續(xù)多DNA位點(diǎn)的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201811642890.0 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN110157781B 公開(公告)日 2019-08-23
申請(qǐng)公布號(hào) CN110157781B 申請(qǐng)公布日 2019-08-23
分類號(hào) C12Q1/686(2018.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 鄭焱;陳佩璇;盧炫廷;邱美蘭;謝龍旭;邱雪蓮;吳丹葉;徐愛娟 申請(qǐng)(專利權(quán))人 廣州凱普醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司 代理人 廣州凱普醫(yī)藥科技有限公司;廣州凱普醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司;廣州凱普生物科技有限公司
地址 510000廣東省廣州市黃埔區(qū)九龍鎮(zhèn)中新知識(shí)城鳳凰三橫路71號(hào)2號(hào)試劑車間四樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種重疊延伸PCR結(jié)合Sanger測(cè)序檢測(cè)不連續(xù)多DNA位點(diǎn)的方法,本方法一對(duì)用于重疊延伸PCR的全長(zhǎng)擴(kuò)增的引物,其核苷酸序列如SEQ ID No.1~2所示。本發(fā)明通過一次PCR將不連續(xù)的位點(diǎn)連接成一條DNA片段,對(duì)這條包含多個(gè)檢測(cè)位點(diǎn)所在片段,可以一次性進(jìn)行Sanger測(cè)序分析,利用本發(fā)明可以將任意的2~4個(gè)包含各自檢測(cè)位點(diǎn)的片段拼接連接形成融合片段,快速、簡(jiǎn)單,不需要限制性內(nèi)切酶,中間無任何非目的基因的DNA序列,進(jìn)而檢測(cè)的檢測(cè)突破了Sanger測(cè)序讀長(zhǎng)的限制,可以通過一個(gè)Sanger測(cè)序反應(yīng)同時(shí)檢測(cè)多個(gè)不連續(xù)的DNA位點(diǎn)。??