一種微小型節(jié)肢昆蟲基因組長片段DNA提取方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710918615.6 申請日 -
公開（公告）號 CN107557357A 公開（公告）日 2018-01-09
申請公布號 CN107557357A 申請公布日 2018-01-09
分類號 C12N15/10(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 史典義;曹曉黎;范麗麗;張藝;熊玉宇;洪綿娥 申請（專利權(quán)）人 晶能生物技術(shù)（上海）有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上?？坡蓪＠硎聞?wù)所（特殊普通合伙） 代理人 袁亞軍;金碎平
地址 201111 上海市閔行區(qū)元江路5500號第2幢1187室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種微小型節(jié)肢昆蟲基因組長片段DNA提取方法，包括：步驟S1)、材料研磨收集細(xì)胞核：采用成蟲個(gè)體作為起始材料，對蟲體組織裂解去除蟲體軀殼，獲得細(xì)胞懸浮液；步驟S2)、膠塊包埋：將所述細(xì)胞懸浮液與瓊脂糖混合冷凝制成膠塊；步驟S3)、蛋白酶K消化：將所述將膠塊放置于蛋白酶K消化液中，并放置于水浴鍋中孵育；步驟S4)、消化洗滌：在所述膠塊中加入RNA消化酶后溫育后，采用沖洗緩沖液洗滌。本發(fā)明通過濾紙包裹擠壓螨蟲體液，低溫低速離心以及濾膜過濾等步驟，去除蟲體組織的軀殼殘留，DNA提取效果好，使提取的長片段DNA可以滿足全基因組測序的要求。