人工合成長鏈DNA方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN200610148058.6 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN101210038B 公開(公告)日 2012-09-26
申請(qǐng)公布號(hào) CN101210038B 申請(qǐng)公布日 2012-09-26
分類號(hào) C07H21/04(2006.01)I 分類 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 楊光華 申請(qǐng)(專利權(quán))人 中融世康投資有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海新天專利代理有限公司 代理人 楊光華;中融世康投資有限公司
地址 201203 上海市浦東新區(qū)晨暉路377弄144號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種人工合成長鏈DNA方法,本發(fā)明方法核心技術(shù)在于將DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)的特性引入到引物設(shè)計(jì)中,并結(jié)合新的逐步降溫連接法(同時(shí)可采用連接酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)或者T4連接酶反應(yīng))使位于同一條鏈上的各條引物與另一條鏈上的“橋”式單鏈寡核苷酸引物配對(duì)而按照特定的順序連接起來,經(jīng)過逐步降溫連接反應(yīng)(或40個(gè)連接酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)循環(huán)或4-16度T4連接酶反應(yīng))后得到大量的單鏈DNA模板,然后再經(jīng)過最后的PCR反應(yīng)擴(kuò)增出所需的DNA雙鏈。本發(fā)明方法成本低、步驟簡單、速度快,突變率低,有較大應(yīng)用價(jià)值。