一種制備人膽囊癌吉西他濱耐藥細(xì)胞系的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201810088795.4 申請日 -
公開（公告）號 CN108315303B 公開（公告）日 2021-03-30
申請公布號 CN108315303B 申請公布日 2021-03-30
分類號 C12N5/09(2010.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 鎖濤;劉厚寶;王剛 申請（專利權(quán)）人 麥遞途醫(yī)療科技（上海）有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海容慧專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 于曉菁
地址 200032上海市徐匯區(qū)楓林路180號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 一種制備人膽囊癌吉西他濱耐藥細(xì)胞系的方法，取對數(shù)生長期的人膽囊癌細(xì)胞接種在含新生胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液中，置于飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，在培養(yǎng)液中加入吉西他濱進(jìn)行誘導(dǎo)，待細(xì)胞恢復(fù)正常生長時，濃度遞增，當(dāng)細(xì)胞能在0.5μmol/L濃度下正常生長、傳代時，用1.0μmol/L吉西他濱沖擊培養(yǎng)，立即更換吉西他濱濃度為0.5μmol/L的培養(yǎng)基培養(yǎng)5～10天，待細(xì)胞穩(wěn)定生長、傳代時，再次沖擊，直至細(xì)胞能在10.0μmol/L的吉西他濱中生長，獲得能夠在含有10μmol/L吉西他濱的培養(yǎng)體系中穩(wěn)定生長、傳代的人膽囊癌吉西他濱耐藥細(xì)胞系。本發(fā)明的方法簡便易行、建立時間短；且耐藥指數(shù)均達(dá)10以上。??