重組溶瘤腺病毒、用于制備該重組溶瘤腺病毒的重組溶瘤腺病毒載體及其構(gòu)建方法和應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201810206375.1 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN108424932B 公開(公告)日 2018-08-21
申請(qǐng)公布號(hào) CN108424932B 申請(qǐng)公布日 2018-08-21
分類號(hào) C12N15/861(2006.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 孟二紅 申請(qǐng)(專利權(quán))人 北京多贏時(shí)代轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究院
代理機(jī)構(gòu) 北京中譽(yù)威圣知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 周勇;周際
地址 100176北京市大興區(qū)亦莊經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)科創(chuàng)六街88號(hào)院3號(hào)樓1503室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了重組溶瘤腺病毒、用于制備該重組溶瘤腺病毒的重組溶瘤腺病毒載體及其構(gòu)建方法和應(yīng)用,所述重組溶瘤腺病毒載體的構(gòu)建方法包括以下步驟:在腺病毒質(zhì)粒中引入編碼RGD肽的基因,構(gòu)成靶向性骨架質(zhì)粒;將shRNA抗腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志分子ALDH1A1的基因序列以及促凋亡基因PUMA的基因序列連接至第一穿梭質(zhì)粒,構(gòu)成第二穿梭質(zhì)粒;將人端粒逆轉(zhuǎn)錄酶啟動(dòng)子連接至第二穿梭質(zhì)粒,構(gòu)成第三穿梭質(zhì)粒;將第三穿梭質(zhì)粒與靶向性骨架質(zhì)粒在大腸桿菌中重組為重組溶瘤腺病毒載體;該方法構(gòu)建出的重組溶瘤腺病毒載體線性化后轉(zhuǎn)染至病毒包裝細(xì)胞中進(jìn)行包裝、擴(kuò)增、純化后獲得重組溶瘤腺病毒,從而能夠有效的識(shí)別并殺死多種惡性腫瘤的腫瘤干細(xì)胞和普通腫瘤細(xì)胞。??