一種Il21基因敲除小鼠模型及其構(gòu)建方法、應(yīng)用
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202011540705.4 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開(kāi)（公告）號(hào) | CN112662669A | 公開(kāi)（公告）日 | 2021-04-16 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN112662669A | 申請(qǐng)公布日 | 2021-04-16 |
| 分類(lèi)號(hào) | C12N15/113;C12N15/85;C12N15/89;C12N5/10;A01K67/027;A01K67/02;A61K49/00 | 分類(lèi) | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 史培良;樊皓月;辛聞婷 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 | 成都藥康生物科技有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 成都行之專(zhuān)利代理事務(wù)所（普通合伙） | 代理人 | 唐邦英 |
| 地址 | 610000 四川省成都市溫江區(qū)成都海峽兩岸科技產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)園青啤大道319號(hào)“?？齐娮有畔a(chǎn)業(yè)園”1棟1003樓 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明公開(kāi)了一種Il21基因敲除小鼠模型及其構(gòu)建方法、應(yīng)用，構(gòu)建方法包括以下步驟：S1、基于CRISPR/Cas9技術(shù)，確定Il21基因的敲除區(qū)域，根據(jù)確定的敲除區(qū)域設(shè)計(jì)特異性靶位點(diǎn)sgRNA1和sgRNA2，gRNA1和gRNA2的基因序列分別如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示；S2、將有活性的gRNA1、gRNA2、cas9蛋白顯微注射入小鼠受精卵中，取注射后存活的受精卵移植到假孕雌鼠體內(nèi)，待其懷孕產(chǎn)仔獲得F0代小鼠；S3、將步驟S2獲得的F0代小鼠與野生型小鼠交配，獲得的F1代雜合子；S4、將步驟S3獲得的F1代雜合子近交獲得F2代小鼠即為IL21基因敲除小鼠模型。本發(fā)明基于CRISPR/Cas9技術(shù)，通過(guò)設(shè)計(jì)合理的異性靶位點(diǎn)gRNA1和gRNA2基因序列，首次通過(guò)敲除Il21基因的ENSMUST00000029273.7轉(zhuǎn)錄本中exon3?exon5區(qū)域建立了小鼠動(dòng)物模型，能夠在腫瘤愈后相關(guān)研究中的應(yīng)用。 |
