一種含WSB1基因啟動(dòng)子和報(bào)告基因的重組質(zhì)粒及其構(gòu)建方法和應(yīng)用
基本信息
申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201811610951.5 | 申請(qǐng)日 | - |
公開(公告)號(hào) | CN109576297B | 公開(公告)日 | 2022-06-24 |
申請(qǐng)公布號(hào) | CN109576297B | 申請(qǐng)公布日 | 2022-06-24 |
分類號(hào) | C12N15/63;C12N15/65;C12Q1/66;C12Q1/02 | 分類 | 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程; |
發(fā)明人 | 周利紅;李琦;馮煜;伏杰;隋華;王炎;季青;馮媛媛;劉寧寧;呼雪慶 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院 |
代理機(jī)構(gòu) | 上海卓陽知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) | 代理人 | 周春洪 |
地址 | 200021 上海市黃浦區(qū)普安路185號(hào) | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明提供了一種含WSB1基因啟動(dòng)子和報(bào)告基因的重組質(zhì)粒及其構(gòu)建方法和應(yīng)用。具體地,克隆WSB1基因啟動(dòng)子特異性序列,重組到含螢火蟲熒光素酶報(bào)告基因載體序列中,構(gòu)建含WSB1基因啟動(dòng)子和報(bào)告基因的重組質(zhì)粒,再將構(gòu)建的重組質(zhì)粒與海腎熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒pRL?TK共轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞,使其穩(wěn)定表達(dá),最后通過檢測雙熒光素酶的活性來反映WSB1基因啟動(dòng)子啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的活性,從而應(yīng)用于靶向篩選抗腫瘤藥物。本發(fā)明構(gòu)建的重組質(zhì)粒采用的是WSB1基因啟動(dòng)子,并選取了特定的啟動(dòng)子序列,所構(gòu)建的藥物篩選模型具有高特異性、高靈敏度和高準(zhǔn)確度,實(shí)現(xiàn)了以WSB1為靶點(diǎn)的抗腫瘤藥物的高通量篩選。 |
