一種改進(jìn)的生物樣本中磷酸化肽段的鑒定及定量方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201810287396.0 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN108548876B 公開(kāi)（公告）日 2021-06-08
申請(qǐng)公布號(hào) CN108548876B 申請(qǐng)公布日 2021-06-08
分類(lèi)號(hào) G01N30/02;G01N30/06;G01N30/08 分類(lèi) 測(cè)量；測(cè)試;
發(fā)明人 胡立志;陳希;劉宜子;韓強(qiáng)強(qiáng);尚駿;楊帆;楊中正;秦為輝 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 武漢生物樣本庫(kù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 南京縱橫知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 徐瑛
地址 430000 湖北省武漢市東湖新技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)高新大道666號(hào)生物創(chuàng)新園D1-3A棟
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)一種改進(jìn)的生物樣本中磷酸化肽段的鑒定及定量方法，該方法利用雙甲基化標(biāo)記技術(shù)實(shí)現(xiàn)相對(duì)定量并結(jié)合二氧化鈦富集技術(shù)對(duì)復(fù)雜生物樣本中含量極低的磷酸化肽段進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定和定量；并將脫鹽和雙甲基化標(biāo)記結(jié)合起來(lái)同時(shí)進(jìn)行，減少了樣品制備過(guò)程，有利于磷酸化位點(diǎn)的保持；在二氧化鈦富集過(guò)程中，在上樣緩沖液中加入乙醇酸，能夠排除一些含有酸性氨基酸的肽段對(duì)磷酸化肽段的干擾，有利于提高富集效率；在脫鹽和富集過(guò)程中，將制好的柱子放入EP管中通過(guò)離心的方法使柱子中加入的液體流過(guò)填料代替?zhèn)鹘y(tǒng)的柱層析方法，不僅節(jié)約了實(shí)驗(yàn)時(shí)間而且提高了一次處理樣品的通量，有利于大通量磷酸化肽段的鑒定及定量分析。