一種高產(chǎn)A40926菌株的基因重組迭代復(fù)合誘變選育方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011567813.0 申請日 -
公開（公告）號(hào) CN112626062A 公開（公告）日 2021-04-09
申請公布號(hào) CN112626062A 申請公布日 2021-04-09
分類號(hào) C12N15/01;C12N13/00;C12N15/03;C12N1/21;C12R1/01 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 朱輝;易欣;曹艷茹;汪玉蘭;韓曉彤;嚴(yán)華聰;吳亞瀾;羅靚 申請（專利權(quán)）人 成都雅途生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 四川省成都市天策商標(biāo)專利事務(wù)所 代理人 龔海月
地址 610041 四川省成都市高新區(qū)科園南路88號(hào)天府生命科技園B7號(hào)樓6樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種高產(chǎn)A40926菌株的基因重組迭代復(fù)合誘變選育方法，對(duì)A40926產(chǎn)生菌出發(fā)菌株采用ARTP誘變處理，結(jié)合纈氨酸抗性篩選，獲得相對(duì)高產(chǎn)菌株；選擇一株或幾株相對(duì)高產(chǎn)菌株制備(混合)菌懸液，添加溶菌酶溶液酶解處理一定時(shí)間，獲得原生質(zhì)體懸液，原生質(zhì)體懸液均分后分別熱滅活和紫外滅活后得到雙親本滅活標(biāo)記原生質(zhì)體，將雙親本滅活標(biāo)記的原生質(zhì)體融合，涂布于抗性再生培養(yǎng)基中，融合子菌株經(jīng)搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)，篩選獲得第一代高產(chǎn)A40926菌株，然后進(jìn)行多輪迭代“ARTP?原生質(zhì)體融合“的復(fù)合誘變選育，獲得可穩(wěn)定高產(chǎn)A40926的菌株；該菌株最終產(chǎn)量可達(dá)到2.0～2.2g/L，且傳代6代以內(nèi)具有較好的遺傳穩(wěn)定性。同時(shí)，與出發(fā)菌株相比，代謝產(chǎn)物A40926組分A1和B1含量明顯提高。