一種畢赤酵母表達長效豬源干擾素的方法
基本信息
申請?zhí)?/td> | CN201810364026.2 | 申請日 | - |
公開(公告)號 | CN108588111A | 公開(公告)日 | 2018-09-28 |
申請公布號 | CN108588111A | 申請公布日 | 2018-09-28 |
分類號 | C12N15/81;C12N15/62;C12N1/19;A61K38/21;A61K47/42;A61P31/14;A61P1/12;C12R1/84 | 分類 | 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程; |
發(fā)明人 | 王榮;左文峰;盧英杰;張磊;杜恩岐 | 申請(專利權(quán))人 | 楊凌凱瑞生物科技有限公司 |
代理機構(gòu) | - | 代理人 | - |
地址 | 430075 湖北省武漢市東湖高新技術(shù)開發(fā)區(qū)高新二路388號武漢光谷國際生物醫(yī)藥企業(yè)加速器一期工程7號樓3層1室 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明公開了一種制備豬源長效干擾素λ3的方法和應(yīng)用,屬于基因工程產(chǎn)品制備領(lǐng)域。包括編碼豬源長效干擾素λ3基因的克隆,含豬源干擾素λ3基因和長效元件用不同Linker連接的真核表達載體的構(gòu)建,用所述含不同Linker的豬源干擾素長效λ3基因的重組真核表達載體轉(zhuǎn)化GS115,PCR擴增篩選陽性克隆子,接種陽性克隆子于含0.02%生物素的BMGY培養(yǎng)基,28℃200 rpm培養(yǎng)48小時后離心,棄去上清后用等體積含0.02%生物素的BMMY培養(yǎng)基重懸,并加入1%28℃200 rpm甲醇誘導(dǎo)培養(yǎng),每隔24 h加入終濃度1%甲醇,培養(yǎng)96 h后取上清,制備不同連接Linker的蛋白表達。所述制備的豬源長效干擾素λ3具有更長的半衰期,較報道的普通干擾素λ3半衰期(4 h以內(nèi))提高10倍以上。 |
