一種畢赤酵母表達長效豬源干擾素的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201810364026.2 申請日 -
公開（公告）號 CN108588111A 公開（公告）日 2018-09-28
申請公布號 CN108588111A 申請公布日 2018-09-28
分類號 C12N15/81;C12N15/62;C12N1/19;A61K38/21;A61K47/42;A61P31/14;A61P1/12;C12R1/84 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王榮;左文峰;盧英杰;張磊;杜恩岐 申請（專利權(quán)）人 楊凌凱瑞生物科技有限公司
代理機構(gòu) - 代理人 -
地址 430075 湖北省武漢市東湖高新技術(shù)開發(fā)區(qū)高新二路388號武漢光谷國際生物醫(yī)藥企業(yè)加速器一期工程7號樓3層1室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種制備豬源長效干擾素λ3的方法和應(yīng)用，屬于基因工程產(chǎn)品制備領(lǐng)域。包括編碼豬源長效干擾素λ3基因的克隆，含豬源干擾素λ3基因和長效元件用不同Linker連接的真核表達載體的構(gòu)建，用所述含不同Linker的豬源干擾素長效λ3基因的重組真核表達載體轉(zhuǎn)化GS115，PCR擴增篩選陽性克隆子，接種陽性克隆子于含0.02%生物素的BMGY培養(yǎng)基，28℃200 rpm培養(yǎng)48小時后離心，棄去上清后用等體積含0.02%生物素的BMMY培養(yǎng)基重懸，并加入1%28℃200 rpm甲醇誘導(dǎo)培養(yǎng)，每隔24 h加入終濃度1%甲醇，培養(yǎng)96 h后取上清，制備不同連接Linker的蛋白表達。所述制備的豬源長效干擾素λ3具有更長的半衰期，較報道的普通干擾素λ3半衰期（4 h以內(nèi)）提高10倍以上。