一種基于Ion ProtonTM測(cè)序平臺(tái)的血液游離DNA的文庫(kù)構(gòu)建方法、試劑及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201610139977.0 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN105695448A 公開（公告）日 2016-06-22
申請(qǐng)公布號(hào) CN105695448A 申請(qǐng)公布日 2016-06-22
分類號(hào) C12N15/10(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I;C40B40/06(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 丁聰聰;丁志遠(yuǎn);葉佳芝;牟曉威;邱寶義;劉明明;陳賢豐 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 浙江圣庭醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京華仲龍騰專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 浙江圣庭生物科技有限公司
地址 318020 浙江省臺(tái)州市黃巖區(qū)東城街道東浦社區(qū)王西路41號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種基于Ion?ProtonTM測(cè)序平臺(tái)的血液游離DNA的文庫(kù)構(gòu)建方法、試劑及其應(yīng)用，構(gòu)建過程包括血液游離DNA提取、末端修復(fù)、片段選擇、接頭連接、磁珠純化、文庫(kù)擴(kuò)增、文庫(kù)檢測(cè)、高通量測(cè)序等步驟。本發(fā)明還提供一種用于構(gòu)建基于Ion?ProtonTM測(cè)序平臺(tái)的血液游離DNA文庫(kù)的血液游離DNA提取試劑、末端修復(fù)試劑、接頭連接反應(yīng)試劑、擴(kuò)增試劑。本發(fā)明明顯提高了孕婦血漿胎兒游離DNA的提取濃度，且步驟簡(jiǎn)單，成本低，提高了建庫(kù)的成功率；優(yōu)化后的文庫(kù)構(gòu)建體系更利于操作，節(jié)省成本，且更換磁珠后，純化回收效率更高；文庫(kù)擴(kuò)增也不需湊夠樣本量和二次檢測(cè)，操作更加簡(jiǎn)單。本發(fā)明方法更適用于胎兒染色體非整倍體無創(chuàng)產(chǎn)前診斷。