一種用于靶向雜交捕獲的修飾性DNA雜交探針的制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201610124516.6 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN105647907B 公開(kāi)（公告）日 2019-03-08
申請(qǐng)公布號(hào) CN105647907B 申請(qǐng)公布日 2019-03-08
分類(lèi)號(hào) C12N15/10（2006.01）I 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 郎秋蕾; 周小川; 方超; 殷楠楠; 孟佳軍 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 杭州聯(lián)川生物技術(shù)股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 杭州杭誠(chéng)專(zhuān)利事務(wù)所有限公司 代理人 杭州聯(lián)川生物技術(shù)股份有限公司
地址 浙江省杭州市經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)6號(hào)大街260號(hào)16幢四層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種用于靶向雜交捕獲的修飾性DNA雜交探針的制備方法主要方法為：制備DNA模板，PCR擴(kuò)增，純化PCR產(chǎn)物；對(duì)純化后的PCR產(chǎn)物進(jìn)行USER酶切割以及T4 DNA聚合酶末端平滑化，Lambda核酸外切酶水解產(chǎn)物的雙鏈DNA中一條帶有5′端磷酸化的單鏈，從而獲得帶有生物素標(biāo)記的單鏈DNA；磁珠富集法純化帶有生物素標(biāo)記的單鏈DNA，得修飾性DNA雜交探針。本發(fā)明極大了降低了生產(chǎn)成本、使用范圍廣，包括任意物種基因組的外顯子區(qū)域、內(nèi)含子區(qū)域、線(xiàn)粒體區(qū)域以及內(nèi)含子區(qū)域等。所獲得的DNA雜交探針可以應(yīng)用于二代測(cè)序靶向文庫(kù)的構(gòu)建以及測(cè)序。