一種用于靶向雜交捕獲的修飾性DNA雜交探針的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201610124516.6 申請日 -
公開（公告）號 CN105647907A 公開（公告）日 2016-06-08
申請公布號 CN105647907A 申請公布日 2016-06-08
分類號 C12N15/10(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 郎秋蕾;周小川;方超;殷楠楠;孟佳軍 申請（專利權(quán)）人 杭州聯(lián)川生物技術(shù)股份有限公司
代理機構(gòu) 杭州杭誠專利事務(wù)所有限公司 代理人 杭州聯(lián)川生物技術(shù)有限公司;杭州聯(lián)川生物技術(shù)股份有限公司
地址 310018 浙江省杭州市下沙經(jīng)濟開發(fā)區(qū)六號大街452號2幢B1805室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種用于靶向雜交捕獲的修飾性DNA雜交探針的制備方法主要方法為：制備DNA模板，PCR擴增，純化PCR產(chǎn)物；對純化后的PCR產(chǎn)物進行USER酶切割以及T4?DNA聚合酶末端平滑化，Lambda核酸外切酶水解產(chǎn)物的雙鏈DNA中一條帶有5′端磷酸化的單鏈，從而獲得帶有生物素標記的單鏈DNA；磁珠富集法純化帶有生物素標記的單鏈DNA，得修飾性DNA雜交探針。本發(fā)明極大了降低了生產(chǎn)成本、使用范圍廣，包括任意物種基因組的外顯子區(qū)域、內(nèi)含子區(qū)域、線粒體區(qū)域以及內(nèi)含子區(qū)域等。所獲得的DNA雜交探針可以應(yīng)用于二代測序靶向文庫的構(gòu)建以及測序。