一種用于評(píng)估逆轉(zhuǎn)錄效率的方法及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202210372220.1 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN114657235A 公開(kāi)(公告)日 2022-06-24
申請(qǐng)公布號(hào) CN114657235A 申請(qǐng)公布日 2022-06-24
分類(lèi)號(hào) C12Q1/6851(2018.01)I;C12Q1/70(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;G01N30/86(2006.01)I;G01N21/33(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N 分類(lèi) 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 牛春艷;戴新華;董蓮華;王霞;高運(yùn)華 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院
代理機(jī)構(gòu) 北京知文通達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 -
地址 100029北京市朝陽(yáng)區(qū)北三環(huán)東路18號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種用于評(píng)估逆轉(zhuǎn)錄效率的方法。對(duì)所建立的或所使用的逆轉(zhuǎn)錄?PCR定量方法的逆轉(zhuǎn)錄效率,提出一套基于同位素稀釋質(zhì)譜法的高準(zhǔn)確度逆轉(zhuǎn)錄效率評(píng)估方案。首先通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄數(shù)字PCR對(duì)目的基因的RNA進(jìn)行拷貝數(shù)濃度的測(cè)定,再進(jìn)一步通過(guò)同位素稀釋質(zhì)譜法來(lái)測(cè)定該目的基因的RNA拷貝數(shù)濃度,計(jì)算獲得的兩種RNA拷貝數(shù)濃度的比值,從而獲得相應(yīng)的逆轉(zhuǎn)錄體系的逆轉(zhuǎn)錄效率。通過(guò)對(duì)逆轉(zhuǎn)錄效率準(zhǔn)確評(píng)估,修正逆轉(zhuǎn)錄PCR結(jié)果,從而獲得目標(biāo)RNA分子的準(zhǔn)確含量,滿(mǎn)足不同領(lǐng)域?qū)NA分子準(zhǔn)確定值的需求。