一種基因工程技術(shù)制備共表達(dá)重組酶的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201310720225.X 申請日 -
公開（公告）號 CN103710329A 公開（公告）日 2014-04-09
申請公布號 CN103710329A 申請公布日 2014-04-09
分類號 C12N9/90(2006.01)I;C12N9/92(2006.01)I;C12N15/61(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王曉艷;門燕;馮俊敏;孫媛霞;張佩舜;朱玥明;康振奎;鞏晉龍;鄭麗萍;王小鵬;李奠礎(chǔ) 申請（專利權(quán)）人 山西天驕生物集團(tuán)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 太原高欣科創(chuàng)專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 山西天驕?zhǔn)硺I(yè)有限公司;中國科學(xué)院天津工業(yè)生物技術(shù)研究所;山西天驕生物集團(tuán)有限公司
地址 030500 山西省呂梁市交城縣成村工業(yè)園區(qū)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于雙酶共表達(dá)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及的是定點(diǎn)突變的葡萄糖異構(gòu)酶和D-阿洛酮糖3-差向異構(gòu)酶共表達(dá)；本發(fā)明為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種對葡萄糖異構(gòu)酶146位氨基酸定點(diǎn)突變，并與D-阿洛酮糖3-差向異構(gòu)酶共表達(dá)的方法，具體為：將定點(diǎn)突變后的葡萄糖異構(gòu)酶的核苷酸序列與D-阿洛酮糖3-差向異構(gòu)酶核苷酸序列分別進(jìn)行PCR擴(kuò)增、純化、克??；將克隆得到的雙酶核苷酸序列分別與pCDFDuet-1載體進(jìn)行雙酶切，酶切產(chǎn)物純化連接，構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒，誘導(dǎo)表達(dá)得到重組菌，收集重組菌超聲破碎得到含有雙酶的粗酶液。