一種適用于單鏈DNA的高通量測(cè)序文庫(kù)構(gòu)建方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201811073055.X 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN110904512A 公開（公告）日 2020-03-24
申請(qǐng)公布號(hào) CN110904512A 申請(qǐng)公布日 2020-03-24
分類號(hào) C40B50/06;C12Q1/6806;C12Q1/6886 分類 組合技術(shù)〔8〕;
發(fā)明人 李志隆;汪宇盈;葉明芝;葉李莉;劉繼龍;宋炎;陳雙雙 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 天津華大醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 廣州華大基因醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司;深圳華大基因股份有限公司;深圳華大臨床檢驗(yàn)中心;天津華大醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司;華大數(shù)極生物科技（深圳）有限公司
地址 510006 廣東省廣州市番禺區(qū)小谷圍街中二橫路22號(hào)A305房
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種適用于單鏈DNA的高通量測(cè)序文庫(kù)構(gòu)建方法。本發(fā)明方法包括：將單鏈模板與帶有簡(jiǎn)并堿基的雙鏈接頭1相連(帶有簡(jiǎn)并堿基的特殊接頭使單鏈模板與雙鏈接頭連接成為可能，雙鏈接頭可隨機(jī)地結(jié)合到單鏈模板上，使接頭序列與模板充分靠近，再使用T4 DNA連接酶完成連接)；采用延伸引物進(jìn)行延伸，得到雙鏈產(chǎn)物；將雙鏈產(chǎn)物與接頭2相連；以所得連接產(chǎn)物為模板，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得所需文庫(kù)。本發(fā)明可用于構(gòu)建高通量測(cè)序文庫(kù)，且可用于單鏈DNA文庫(kù)構(gòu)建，本發(fā)明將提高高通量測(cè)序文庫(kù)構(gòu)建中單鏈DNA利用率，進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)低起始量建庫(kù)的目的，在未來腫瘤早篩和預(yù)后監(jiān)測(cè)應(yīng)用中發(fā)揮關(guān)鍵作用。