一種調(diào)控PCV2病毒增殖的序列及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910336909.7 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN110055251B 公開(kāi)（公告）日 2022-05-27
申請(qǐng)公布號(hào) CN110055251B 申請(qǐng)公布日 2022-05-27
分類(lèi)號(hào) C12N15/113（2010.01）I;C12N15/85（2006.01）I;C12N15/90（2006.01）I;A61P31/20（2006.01）I 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李俊;時(shí)建立;彭喆;吳曉燕;鄭書(shū)軒;徐紹建;劉暢;韓紅;王碩;孫盼盼;王妍 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所
代理機(jī)構(gòu) 濟(jì)南泉城專(zhuān)利商標(biāo)事務(wù)所 代理人 -
地址 250100山東省濟(jì)南市歷城區(qū)桑園路8號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種調(diào)控PCV2病毒增殖的gRNAs序列。本發(fā)明設(shè)計(jì)了與PCV2復(fù)制相關(guān)的8個(gè)gRNA靶向片段：gRNA?Oc8，gRNA?O13，gRNA?O134，gRNA?O26，gRNA?NPS，gRNA?NQT和gRNA?NAT，分別靶向PCV2復(fù)制起點(diǎn)的八聚體結(jié)構(gòu)、ORF1和ORF3的重疊區(qū)、ORF1，ORF3和ORF4的重疊區(qū)、ORF2和ORF6的重疊區(qū)、ORF1的23?25aa糖基化位點(diǎn)、ORF1的256?258aa糖基化位點(diǎn)及ORF1的286?288aa糖基化位點(diǎn)。以pX458為表達(dá)載體，獲得PCV2 Cas9/gRNAs重組質(zhì)粒，并對(duì)陽(yáng)性Cas9/gRNAs克隆進(jìn)行了測(cè)序鑒定。同時(shí)，成功得到以PCV2 Cas9/gRNAs重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的PK?15細(xì)胞系，且PCV2 Cas9/gRNAs重組質(zhì)粒能對(duì)PCV2基因組進(jìn)行有效編輯，并抑制PCV2在PK?15細(xì)胞內(nèi)的增殖復(fù)制。