一種新型冠狀病毒SARS-CoV-2木瓜樣蛋白酶表達(dá)和純化方法
基本信息
| 申請?zhí)?/td> | CN202011351314.8 | 申請日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN112481242A | 公開（公告）日 | 2021-03-12 |
| 申請公布號(hào) | CN112481242A | 申請公布日 | 2021-03-12 |
| 分類號(hào) | C12R1/19(2006.01)N;C12N9/50(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 張進(jìn);李健;鐘芳林;萬雙燕 | 申請（專利權(quán)）人 | 江西晶美瑞生物醫(yī)藥有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 新余市渝星知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） | 代理人 | 廖平 |
| 地址 | 518000廣東省深圳市坪山區(qū)坪山街道六聯(lián)社區(qū)坪山大道2007號(hào)創(chuàng)新廣場C1102 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種新型冠狀病毒SARS?CoV?2木瓜樣蛋白酶表達(dá)和純化方法，步驟有：構(gòu)建并轉(zhuǎn)化表達(dá)質(zhì)粒；取菌液到含有50μg/ml Kan+抗生素的LB液體培養(yǎng)基中，在搖床上培養(yǎng)，加入IPTG，誘導(dǎo)培養(yǎng)；菌液離心，在緩沖液中重懸，破碎離心取上清鎳柱進(jìn)行蛋白酶純化，不同咪唑濃度的洗脫液進(jìn)行洗脫，將含有PLpro的洗脫液用陰離子交換柱進(jìn)行進(jìn)一步的純化，得到目的蛋白酶，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)有：利用大腸桿菌蛋白表達(dá)系統(tǒng)獲得大量PLpro，并且周期短，耗費(fèi)成本低，轉(zhuǎn)化操作簡單，可重復(fù)性高，可投入大量生產(chǎn)過程，能獲得高純度目標(biāo)產(chǎn)物，為抗病毒研究提供基礎(chǔ)。?? |
