一種由畢赤酵母表達(dá)串聯(lián)蛋白的純化工藝

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201811602069.6 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN111363025A 公開(kāi)(公告)日 2020-07-03
申請(qǐng)公布號(hào) CN111363025A 申請(qǐng)公布日 2020-07-03
分類(lèi)號(hào) C07K14/62;C12P21/06;C07K1/30;C07K1/16;C07K1/34;C07K1/36 分類(lèi) -
發(fā)明人 賈偉平;李校堃;程萍;倪晶 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 上海新生源醫(yī)藥集團(tuán)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海一平知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 徐林強(qiáng);徐迅
地址 201203 上海市浦東新區(qū)中國(guó)(上海)自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)蔡倫路780號(hào)208室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種由畢赤酵母表達(dá)串聯(lián)蛋白的純化工藝。具體地,本發(fā)明提供一種重組人胰島素原C肽串聯(lián)蛋白的純化方法,包括步驟:(1)對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行離心,得到發(fā)酵離心上清液;(2)加入電解質(zhì)進(jìn)行鹽析,得到沉淀蛋白;(3)加入復(fù)溶劑,得到沉淀蛋白復(fù)溶液;(4)沉淀蛋白復(fù)溶液經(jīng)第一柱層析純化;(5)加入胰蛋白酶和羧肽酶B進(jìn)行雙酶切,得到酶切液;(6)對(duì)所述的酶切液依次進(jìn)行反相超濾和正相超濾,得到超濾液;(7)所述的超濾液經(jīng)第二柱層析純化;(8)進(jìn)行正相超濾,得到重組人胰島素原C肽原液。本發(fā)明所述方法能夠制備高純度和高收率的重組人胰島素原C肽。