雜交瘤細胞表達基因工程尿激酶原的制備方法
基本信息
申請?zhí)?/td> | CN03129106.6 | 申請日 | - |
公開(公告)號 | CN100420745C | 公開(公告)日 | 2008-09-24 |
申請公布號 | CN100420745C | 申請公布日 | 2008-09-24 |
分類號 | C12N9/72(2006.01);C12N15/58(2006.01);C12N5/12(2006.01) | 分類 | 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程; |
發(fā)明人 | 王縵;顧燕黎;李慶;吳利紅;許琦 | 申請(專利權(quán))人 | 上??迫A生物藥業(yè)有限公司 |
代理機構(gòu) | 上海正旦專利代理有限公司 | 代理人 | 上海實業(yè)科華生物藥業(yè)有限公司;上??迫A生物工程股份有限公司 |
地址 | 200233上海市欽州北路1189號 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明提供一種雜交瘤細胞表達尿激酶原的制備方法,該方法中尿激酶原工程細胞株的培養(yǎng)是將尿激酶原工程細胞株先用有血清培養(yǎng),至細胞密度上升到2-4×105個/毫升后,轉(zhuǎn)入生物反應(yīng)器內(nèi),并降低胎牛血清濃度,待細胞密度上升到2-2.5×106個/毫升后開始無血清灌注培養(yǎng),通過調(diào)節(jié)灌注量來始終確保細胞密度不低于1×106個/毫升,并收集培養(yǎng)上清進行純化。本發(fā)明還提供了一種直接采用上述方法中經(jīng)全無血清灌注培養(yǎng)制得的工程細胞株先進行有血清復(fù)蘇,然后進行無血清培養(yǎng),再進行全無血清灌注培養(yǎng)并收集培養(yǎng)上清進行純化的制備尿激酶原的方法。 |
