一種無CO2環(huán)境的MDCK細胞全懸浮無血清細胞系的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811331150.5 申請日 -
公開(公告)號 CN109609436A 公開(公告)日 2019-04-12
申請公布號 CN109609436A 申請公布日 2019-04-12
分類號 C12N5/071;C12R1/91 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 安芳蘭;陶世宇;武發(fā)菊;田波;李菁;葛玉鳳;柴立麗;董文教;程芳珍;劉強;丁小龍;劉學(xué)榮 申請(專利權(quán))人 中農(nóng)威特生物科技股份有限公司
代理機構(gòu) 北京成實知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 中農(nóng)威特生物科技股份有限公司
地址 730046 甘肅省蘭州市城關(guān)區(qū)鹽場堡徐家坪1號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種無CO2環(huán)境的MDCK細胞全懸浮無血清細胞系的制備方法,包括以下步驟:復(fù)蘇MDCK細胞進行擴增培養(yǎng);將獲得的細胞進行無血清貼壁培養(yǎng)馴化;將獲得的細胞懸液置于恒溫振蕩培養(yǎng)箱中使之從5%CO2環(huán)境逐步適應(yīng)無CO2環(huán)境的全懸浮培養(yǎng);利用正交試驗L9(34)確定馴化成功的全懸浮培養(yǎng)細胞系的關(guān)鍵過程控制參數(shù);將獲得的過程參數(shù)對細胞進行直線逐級放大,建立該細胞系的(2L?10L?100L?500L)規(guī)?;a(chǎn)模型。MDCK細胞系密度及活力高、增值能力強,細胞形態(tài)良好,建立規(guī)模化生產(chǎn)模型不受CO2環(huán)境條件限制,填補MDCK細胞無CO2環(huán)境規(guī)模化懸浮培養(yǎng)的空白,可規(guī)?;本€放大,為MDCK細胞的規(guī)模化懸浮培養(yǎng)提供便捷的培養(yǎng)方式,為流感病毒疫苗等生物制品制備提供技術(shù)支持。