基于Cre重組酶誘導(dǎo)的大規(guī)模慢病毒基因藥物制備系統(tǒng)及方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110157755.2 申請日 -
公開（公告）號 CN112852746A 公開（公告）日 2021-05-28
申請公布號 CN112852746A 申請公布日 2021-05-28
分類號 C12N15/66(2006.01)I;C12N15/52(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/866(2006.01)I;C07K14/47(2006.01)I;C12N15/867(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 董文吉;趙忠亮;陳志川;董祖伊;劉子瑾;程謨斌;張艷君 申請（專利權(quán)）人 中吉智藥（南京）生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京易捷勝知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 齊勝杰
地址 211199江蘇省南京市江北新區(qū)新錦湖路3-1號中丹生態(tài)生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)園一期A座618室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種基于Cre重組酶誘導(dǎo)的大規(guī)模慢病毒基因藥物制備系統(tǒng)，其包括：懸浮293穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株和表達(dá)Cre基因的病毒；所述懸浮293穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的基因組上整合了慢病毒包裝蛋白表達(dá)序列和目的基因序列；且所述慢病毒包裝蛋白表達(dá)序列與驅(qū)動(dòng)其表達(dá)的啟動(dòng)子之間插入loxP?Stop?loxP序列；loxP?Stop?loxP序列包含兩個(gè)方向相同的loxP位點(diǎn)以及連接在兩個(gè)loxP位點(diǎn)之間的Stop序列；所述表達(dá)Cre基因的病毒為可感染懸浮293細(xì)胞且能夠表達(dá)Cre蛋白的病毒；所述表達(dá)Cre基因的病毒用于感染所述懸浮293穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株，激活慢病毒包裝蛋白表達(dá)序列進(jìn)行表達(dá)，以包裝產(chǎn)生慢病毒。本發(fā)明其解決了質(zhì)粒瞬時(shí)轉(zhuǎn)染成本高，放大困難的問題；同時(shí)利用表達(dá)Cre基因的病毒感染進(jìn)行誘導(dǎo)，避免四環(huán)素等抗生素誘導(dǎo)后難以去除的工藝難題。??