一種在發(fā)酵過程中測定免疫球蛋白的糖基化和末端修飾情況的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201310027666.1 申請日 -
公開（公告）號 CN103217490B 公開（公告）日 2016-08-03
申請公布號 CN103217490B 申請公布日 2016-08-03
分類號 G01N30/02(2006.01)I 分類 測量；測試;
發(fā)明人 朱保國;彭育才;楊嘉明 申請（專利權(quán)）人 珠海市麗珠單抗生物技術(shù)有限公司
代理機構(gòu) 北京泛華偉業(yè)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 劉丹妮
地址 519020 廣東省珠海市香洲區(qū)拱北桂花北路108號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供一種測定免疫球蛋白發(fā)酵液樣品的糖基化和末端修飾情況的方法，該方法能夠同時、快速地對免疫球蛋白糖基化、N端焦谷氨酸化和C端脫賴氨酸進(jìn)行測定，所述方法包括以下步驟：1)使用親和色譜(Protein?A)初步純化免疫球蛋白，并使用超濾離心裝置濃縮樣品；2)使步驟1)中濃縮后的免疫球蛋白經(jīng)變性劑變性后，使用還原劑還原，從而拆分輕鏈和重鏈；3)使用反相超高壓液相色譜分離步驟2)中免疫球蛋白的輕鏈和重鏈；4)使用質(zhì)譜測定步驟3)中獲得的輕鏈和重鏈的分子量；以及5)分析步驟3)中的色譜數(shù)據(jù)和步驟4)中的質(zhì)譜數(shù)據(jù)，從而測定所述免疫球蛋白的糖基化和末端修飾情況。