不同啟動(dòng)子啟動(dòng)多個(gè)串聯(lián)sgRNA表達(dá)的質(zhì)粒構(gòu)建方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201810935546.4 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN110835635A 公開（公告）日 2020-02-25
申請(qǐng)公布號(hào) CN110835635A 申請(qǐng)公布日 2020-02-25
分類號(hào) C12N15/90;C12N15/63 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 高千千;趙正琦;李燕珊;丁仁鵬;李波;侯勇;王飛 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 武漢華大吉諾因生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 關(guān)暢;張立娜
地址 518083 廣東省深圳市鹽田區(qū)北山工業(yè)區(qū)綜合樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種不同啟動(dòng)子啟動(dòng)多個(gè)串聯(lián)sgRNA表達(dá)的質(zhì)粒構(gòu)建方法。本發(fā)明方法采用常見載體改造為工具載體，然后通過(guò)一些通用序列及通用引物的應(yīng)用，實(shí)現(xiàn)快速構(gòu)建兩個(gè)至多個(gè)sgRNA串聯(lián)的載體。本發(fā)明中，因?yàn)椴煌膕gRNA由不同的啟動(dòng)子啟動(dòng)，從而能夠保證基因編輯效率不受串聯(lián)影響，同時(shí)靶向不同的目的基因片段，實(shí)現(xiàn)高效特異的多基因編輯。另外，該構(gòu)建方法靈活，可根據(jù)實(shí)際需要替換不同的sgRNA，具有廣闊的應(yīng)用前景。