一種從土壤樣本中高效擴(kuò)增微生物DNA的方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202010566375.X | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開(kāi)（公告）號(hào) | CN111733219A | 公開(kāi)（公告）日 | 2020-10-02 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN111733219A | 申請(qǐng)公布日 | 2020-10-02 |
| 分類號(hào) | C12Q1/686(2018.01)I;C12Q1/6806(2018.01)I | 分類 | - |
| 發(fā)明人 | 張慧;張鴻;趙琨;李西清 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 安徽微分基因科技有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 安徽申策知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） | 代理人 | 安徽微分基因科技有限公司 |
| 地址 | 238000安徽省巢湖市巢湖經(jīng)濟(jì)開(kāi)發(fā)區(qū)龍泉路6號(hào)未名生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)園一期南區(qū)C樓2層 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明涉及分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，且公開(kāi)了一種從土壤樣本中高效擴(kuò)增微生物DNA的方法，包括以下步驟：步驟1、對(duì)土壤樣本進(jìn)行采集；步驟2、對(duì)采集的土壤樣本進(jìn)行微生物核酸提??；步驟3、對(duì)提取到的核酸進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)；步驟4、原始PCR體系與優(yōu)化后PCR體系擴(kuò)增效果比對(duì)；步驟5、qPCR驗(yàn)證：擴(kuò)增體系中最佳牛血清蛋白(BSA)添加濃度；本發(fā)明通過(guò)采集腐殖酸、有機(jī)物、重金屬離子含量高等特殊土壤樣本，采用Spin Kit for Soil試劑盒提取成功后，PCR擴(kuò)增失敗。通過(guò)優(yōu)化PCR和qPCR體系，在PCR體系中添加牛血清蛋白(BSA)并摸索最佳濃度，使擴(kuò)增成功率達(dá)100％，大幅度提升了PCR擴(kuò)增效率。經(jīng)驗(yàn)證在PCR體系中添加牛血清蛋白(BSA)對(duì)可正常擴(kuò)增的土壤樣本無(wú)影響。?? |
