一種提高NMN生物合成酶Nampt的酶活的創(chuàng)新方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110468908.5 申請日 -
公開（公告）號 CN113073089A 公開（公告）日 2021-07-06
申請公布號 CN113073089A 申請公布日 2021-07-06
分類號 C12N9/10（2006.01）I;C12N15/54（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;C12N1/21（2006.01）I;C12R1/19（2006.01）N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 趙麗青;陳建生;段志剛;張海潮;黃貝佳 申請（專利權(quán)）人 泓博元生命科技（深圳）有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京高沃律師事務(wù)所 代理人 蘇士瑩
地址 518000廣東省深圳市南山區(qū)深圳灣生態(tài)科技園9棟B3座1015
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種提高NMN生物合成酶Nampt的酶活的創(chuàng)新方法，涉及基因工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明所述突變蛋白為利用FoldX和DeepDDG兩款軟件分析目標(biāo)蛋白Nampt的結(jié)構(gòu)，預(yù)測出的多個(gè)影響酶功能的關(guān)鍵位點(diǎn)，進(jìn)行酶的半理性設(shè)計(jì)。在本發(fā)明實(shí)施例中，根據(jù)點(diǎn)突變原理，設(shè)計(jì)引物構(gòu)建了10個(gè)突變菌株，有8個(gè)突變體的活性高于野生型菌株，其中Nampt?V365L突變體的提高了62％，Nampt?S248A、Nampt?N164L、Nampt?S382M、Nampt?A245T和Nampt?A208G的NMN產(chǎn)量分別提高了34％，27％，27％，22％和17％。