一種環(huán)二肽合成酶的高效原核表達(dá)載體及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202010957447.3 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN112063644A 公開(公告)日 2020-12-11
申請(qǐng)公布號(hào) CN112063644A 申請(qǐng)公布日 2020-12-11
分類號(hào) C12N15/70(2006.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 肖芹;黃毓茂;鐘澤民 申請(qǐng)(專利權(quán))人 廣東中山市茂輝生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州長星專利商標(biāo)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 華南農(nóng)業(yè)大學(xué);廣東中山市茂輝生物科技有限公司
地址 510000廣東省廣州市天河區(qū)五山街道華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域,尤指一種環(huán)二肽合成酶的高效原核表達(dá)載體及其應(yīng)用,表達(dá)載體由環(huán)二肽合成酶的基因與Pet28a(+)載體連接構(gòu)成,其構(gòu)建方法包括:1)選擇環(huán)二肽合成酶的基因片段進(jìn)行合成;2)環(huán)二肽合成酶基因與Pet28a(+)載體進(jìn)行連接;3)連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化入DH5a感受態(tài)細(xì)胞中;4)鑒定為陽性的菌落在含Amp的液體LB培養(yǎng)基中培養(yǎng)后提質(zhì)粒;5)將提取的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入大腸桿菌感受態(tài)BL21中;本發(fā)明利用Pet28a(+)載體,構(gòu)建出一種高效的環(huán)二肽合成酶表達(dá)載體,利用IPTG誘導(dǎo)獲得高濃度的環(huán)二肽合成酶合成具有生物活性的環(huán)二肽,實(shí)現(xiàn)簡化操作程序的效果,并解決環(huán)二肽的工業(yè)化生產(chǎn)成本高和收集工序昂貴和復(fù)雜等問題。??