一種在間充質(zhì)干細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)可分泌人胰島素的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202110434985.9 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN113201062B 公開(公告)日 2022-07-01
申請(qǐng)公布號(hào) CN113201062B 申請(qǐng)公布日 2022-07-01
分類號(hào) C07K14/62(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12N15/86(2006.01)I 分類 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 鄧文生;周翔宇;張程 申請(qǐng)(專利權(quán))人 武漢科技大學(xué)
代理機(jī)構(gòu) 成都方圓聿聯(lián)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 -
地址 430081湖北省武漢市青山區(qū)和平大道947號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種在間充質(zhì)干細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)可分泌人胰島素的方法,包括如下步驟:(1)構(gòu)建mCherry?2A?insulin?His融合基因慢病毒表達(dá)載體,(2)將構(gòu)建的mCherry?2A?insulin?His融合基因慢病毒表達(dá)載體在人間充質(zhì)干細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá),即可得到分泌到胞外的人胰島素。當(dāng)轉(zhuǎn)染細(xì)胞后,篩選獲得穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系,細(xì)胞表達(dá)融合多肽并在自切割多肽2A的作用下,人胰島素與mCherry紅色熒光基因分離,人胰島素可分泌至胞外。這一發(fā)明方法解決了當(dāng)前在間充質(zhì)干細(xì)胞中表達(dá)人胰島素的困境,具有重大現(xiàn)實(shí)意義和潛在的醫(yī)學(xué)應(yīng)用價(jià)值。