適用于PacBio測(cè)序平臺(tái)的海洋動(dòng)物與軟體動(dòng)物的建庫測(cè)序方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910213088.8 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN109957605A 公開（公告）日 2019-07-02
申請(qǐng)公布號(hào) CN109957605A 申請(qǐng)公布日 2019-07-02
分類號(hào) C12Q1/6806（2018.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳逢 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 嘉興菲沙基因信息有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海精晟知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 馮子玲
地址 314000 浙江省嘉興市嘉善縣大云鎮(zhèn)創(chuàng)業(yè)路555號(hào)C2幢101室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及高通量測(cè)序文庫構(gòu)建領(lǐng)域，具體涉及一種適用于PacBio測(cè)序平臺(tái)的海洋動(dòng)物與軟體動(dòng)物的建庫測(cè)序方法，包括如下步驟：1)對(duì)打斷的DNA大片段進(jìn)行切膠純化；2)對(duì)純化的DNA大片段進(jìn)行核酸外切酶VII消化；3)對(duì)核酸外切酶VII消化產(chǎn)物進(jìn)行第一次DNA損傷修復(fù)；4)對(duì)第一次DNA損傷修復(fù)的產(chǎn)物進(jìn)行末端修復(fù)處理和加接頭處理；5)對(duì)加接頭的產(chǎn)物進(jìn)行外切酶ExoIII和ExoVII雙酶切處理；6)對(duì)外切酶ExoIII和ExoVII雙酶切處理的產(chǎn)物進(jìn)行二次篩選目的片段；7)對(duì)二次篩選產(chǎn)物進(jìn)行第二次DNA損傷修復(fù)，即獲得適用于Pacbio平臺(tái)的DNA大片段文庫；8)文庫質(zhì)檢；9)上機(jī)測(cè)序。該方法可有效去除海洋軟體動(dòng)物體內(nèi)所含雜質(zhì)，可以顯著提高PacBio測(cè)序聚合酶讀長(zhǎng)和數(shù)據(jù)產(chǎn)量。