一種基于鯉魚上皮瘤細胞EPC的鱖魚傳染性脾腎壞死病毒ISKNV的增殖方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201610536389.0 申請日 -
公開（公告）號 CN105950571B 公開（公告）日 2019-08-23
申請公布號 CN105950571B 申請公布日 2019-08-23
分類號 C12N7/00;C12R1/93 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 周偉東;鄧平;喻運珍;喻婷;張立強;周勇;徐洪亮;艾桃山;林蠡;周裕和 申請（專利權）人 武漢市農(nóng)業(yè)科學技術研究院水產(chǎn)科學研究所
代理機構 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 代理人 喬宇;徐曉琴
地址 430065 湖北省武漢市洪山區(qū)白沙洲大道173號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于生物技術領域，具體涉及一種基于鯉魚上皮瘤細胞EPC的鱖魚傳染性脾腎壞死病毒ISKNV的增殖方法。所述增殖方法為：培養(yǎng)EPC細胞系；用ISKNV感染EPC細胞，恒溫培養(yǎng)后收集培養(yǎng)液上清；再用培養(yǎng)液上清中的ISKNV感染EPC細胞，重復操作2～3次，ISKNV毒種復壯后，取培養(yǎng)液上清液氮保存，作為ISKNV擴增毒種；用復壯后的ISKNV毒種感染EPC細胞，恒溫培養(yǎng)至CPE>80％，收集上清液，獲得ISKNV病毒粒子。本發(fā)明以EPC細胞系作為ISKNV感染的敏感細胞，EPC細胞系商品化程度高，易于獲得，容易培養(yǎng)，并且和鱖魚的親緣關系較遠，可大大降低ISKNV用于滅活疫苗時的純化難度，減少不良反應。