一種重組IL-6蛋白的制備方法及其應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202111669367.9 申請日 -
公開(公告)號 CN114195880A 公開(公告)日 2022-03-18
申請公布號 CN114195880A 申請公布日 2022-03-18
分類號 C07K14/54(2006.01)I;C12N15/24(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;G01N33/68(2006.01)I 分類 有機化學〔2〕;
發(fā)明人 許行尚;杰弗瑞·陳;朱道云;熊凱 申請(專利權)人 江蘇華控生物科技有限公司
代理機構 南京北辰聯(lián)和知識產(chǎn)權代理有限公司 代理人 陸中丹
地址 210000江蘇省南京市江寧區(qū)乾德路2號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種重組IL?6蛋白的制備方法及其應用,制備方法包括以下步驟:S1重組人IL?6基因片段擴增;S2IL?6表達載體pCDNA3.1(+)?IL6的構建;S3將表達載體pCDNA3.1(+)?IL6轉染至HEK293細胞株:S4重組IL?6表達:篩選不同克隆的細胞株培養(yǎng)基上清,收集經(jīng)過表達的細胞株培養(yǎng)基上清,得重組IL?6蛋白。原核表達系統(tǒng)表達的IL?6不能與天然蛋白形成完全一致的蛋白折疊,可能導致表達出的蛋白活性及抗原表位與天然蛋白有較大差距;使用人胚腎細胞(HEK293)作為表達宿主,表達出折疊準確、修飾正確的重組蛋白。