一種重組IL-6蛋白的制備方法及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202111669367.9 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN114195880A 公開(kāi)（公告）日 2022-03-18
申請(qǐng)公布號(hào) CN114195880A 申請(qǐng)公布日 2022-03-18
分類號(hào) C07K14/54（2006.01）I;C12N15/24（2006.01）I;C12N15/85（2006.01）I;G01N33/68（2006.01）I 分類 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 許行尚;杰弗瑞·陳;朱道云;熊凱 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 江蘇華控生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 南京北辰聯(lián)和知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 陸中丹
地址 210000江蘇省南京市江寧區(qū)乾德路2號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種重組IL?6蛋白的制備方法及其應(yīng)用，制備方法包括以下步驟：S1重組人IL?6基因片段擴(kuò)增；S2IL?6表達(dá)載體pCDNA3.1（+）?IL6的構(gòu)建；S3將表達(dá)載體pCDNA3.1（+）?IL6轉(zhuǎn)染至HEK293細(xì)胞株：S4重組IL?6表達(dá)：篩選不同克隆的細(xì)胞株培養(yǎng)基上清，收集經(jīng)過(guò)表達(dá)的細(xì)胞株培養(yǎng)基上清，得重組IL?6蛋白。原核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的IL?6不能與天然蛋白形成完全一致的蛋白折疊，可能導(dǎo)致表達(dá)出的蛋白活性及抗原表位與天然蛋白有較大差距；使用人胚腎細(xì)胞（HEK293）作為表達(dá)宿主，表達(dá)出折疊準(zhǔn)確、修飾正確的重組蛋白。