一種重組IL-6蛋白的制備方法及其應用
基本信息
申請?zhí)?/td> | CN202111669367.9 | 申請日 | - |
公開(公告)號 | CN114195880A | 公開(公告)日 | 2022-03-18 |
申請公布號 | CN114195880A | 申請公布日 | 2022-03-18 |
分類號 | C07K14/54(2006.01)I;C12N15/24(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;G01N33/68(2006.01)I | 分類 | 有機化學〔2〕; |
發(fā)明人 | 許行尚;杰弗瑞·陳;朱道云;熊凱 | 申請(專利權)人 | 江蘇華控生物科技有限公司 |
代理機構 | 南京北辰聯(lián)和知識產(chǎn)權代理有限公司 | 代理人 | 陸中丹 |
地址 | 210000江蘇省南京市江寧區(qū)乾德路2號 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明公開了一種重組IL?6蛋白的制備方法及其應用,制備方法包括以下步驟:S1重組人IL?6基因片段擴增;S2IL?6表達載體pCDNA3.1(+)?IL6的構建;S3將表達載體pCDNA3.1(+)?IL6轉染至HEK293細胞株:S4重組IL?6表達:篩選不同克隆的細胞株培養(yǎng)基上清,收集經(jīng)過表達的細胞株培養(yǎng)基上清,得重組IL?6蛋白。原核表達系統(tǒng)表達的IL?6不能與天然蛋白形成完全一致的蛋白折疊,可能導致表達出的蛋白活性及抗原表位與天然蛋白有較大差距;使用人胚腎細胞(HEK293)作為表達宿主,表達出折疊準確、修飾正確的重組蛋白。 |
