重組 TRAIL 包含體蛋白的工業(yè)化提取、復(fù)性和純化方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN03141811.2 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN1473843A 公開(kāi)（公告）日 2004-02-11
申請(qǐng)公布號(hào) CN1473843A 申請(qǐng)公布日 2004-02-11
分類(lèi)號(hào) C07K1/14 分類(lèi) 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 沈亞領(lǐng);魏東芝;夏小霞 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 上海恰爾生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海順華專利代理有限責(zé)任公司 代理人 陳淑章
地址 200237上海市徐匯區(qū)梅隴路130號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種重組TRAIL包含體蛋白的工業(yè)化提取、復(fù)性與純化方法。該法利用表達(dá)腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(簡(jiǎn)稱TRAIL)的重組大腸桿菌菌體為原料，先進(jìn)行破碎、洗滌等預(yù)處理提取獲得純度＞80％的TRAIL包含體；然后將上述包含體用變性劑進(jìn)行溶解，得到變性溶解液；再將上述所得的包含體變性溶解液用稀釋法進(jìn)行復(fù)性，再用兩步透析法除去殘留的變性劑，得到含有TRAIL活性蛋白的復(fù)性液，最后將上述復(fù)性液經(jīng)超濾濃縮，上柱層析分離等步驟，收集合格的洗脫液，即得本發(fā)明的目標(biāo)產(chǎn)物，一種具有與可溶性表達(dá)蛋白活性相近的復(fù)性重組TRAIL蛋白，其得率可達(dá)40％以上。