重組 TRAIL 包含體蛋白的工業(yè)化提取、復性和純化方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN03141811.2 申請日 -
公開（公告）號 CN1473843A 公開（公告）日 2004-02-11
申請公布號 CN1473843A 申請公布日 2004-02-11
分類號 C07K1/14 分類 有機化學〔2〕;
發(fā)明人 沈亞領;魏東芝;夏小霞 申請（專利權）人 上海恰爾生物技術有限公司
代理機構 上海順華專利代理有限責任公司 代理人 陳淑章
地址 200237上海市徐匯區(qū)梅隴路130號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種重組TRAIL包含體蛋白的工業(yè)化提取、復性與純化方法。該法利用表達腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(簡稱TRAIL)的重組大腸桿菌菌體為原料，先進行破碎、洗滌等預處理提取獲得純度＞80％的TRAIL包含體；然后將上述包含體用變性劑進行溶解，得到變性溶解液；再將上述所得的包含體變性溶解液用稀釋法進行復性，再用兩步透析法除去殘留的變性劑，得到含有TRAIL活性蛋白的復性液，最后將上述復性液經超濾濃縮，上柱層析分離等步驟，收集合格的洗脫液，即得本發(fā)明的目標產物，一種具有與可溶性表達蛋白活性相近的復性重組TRAIL蛋白，其得率可達40％以上。