一種用于檢測豬Kobu病毒的檢測試劑盒

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201210271607.4 申請日 -
公開(公告)號 CN102925586A 公開(公告)日 2013-02-13
申請公布號 CN102925586A 申請公布日 2013-02-13
分類號 C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 徐志文;李雪梅;朱玲;劉孟良;周遠成 申請(專利權(quán))人 四川川嬌農(nóng)牧科技股份有限公司
代理機構(gòu) - 代理人 -
地址 625014 四川省雅安市雨城區(qū)新康路46號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種用于檢測豬Kobu病毒的檢測試劑盒,檢測50個樣品的試劑盒組成如下:試劑A:TRIZOL?20ml、氯仿5ml、異丙醇12.5ml、75%乙醇10ml、RNasa-free水1ml;試劑B:5×PrimeScript?Buffer?100μl、PrimeScript?RT?Enzyme?Mix?I?25μl、Oligo?dT?Primer?25μl、Random?6?mers?100μl、RNase?Free?dH2O?250μl;試劑C:上游引物P1?25μl、下游引物P2?25μl、SYBR?Green?I染料500μl、ddH2O?160μl;上游引物P1:5’-GGACCCAGACACTTACGAACA-3’;下游引物P2:5’-TCGGACCAGAATGGAAAGCA-3’。利用本試劑盒進行實時熒光定量PCR擴增曲線呈現(xiàn)出良好的S型,只出現(xiàn)擴增產(chǎn)物特異性的單個峰,產(chǎn)物的Tm值都在78-79℃之間,說明沒有引物二聚體及非特異性擴增產(chǎn)物出現(xiàn);檢測的靈敏度可達10拷貝/微升,且具有很好的重復性。